如何培育草履蟲
草履蟲(洄水)養(yǎng) 草履蟲是原生動(dòng)物的重要代表,也學(xué)動(dòng)物學(xué)最先的動(dòng)物。
以草履蟲為代表的纖毛蟲在水質(zhì)凈化及監(jiān)測(cè)上有著十分重要的價(jià)值。
本實(shí)驗(yàn)主要是介紹草履蟲的純化和多種培養(yǎng)方法,并通過觀察,掌握原生動(dòng)物的基本特征,進(jìn)而更好地理解有關(guān)原生動(dòng)物的其他知識(shí)。
一、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備 ?。ㄒ唬┎牧? 干稻草、舊稻草墊子、干玉米雄花穗、干荷葉、小麥粒、離芭葉、干酵母、動(dòng)物內(nèi)臟(肝、胰、甲狀腺等)、蛋黃、牛肉汁(50g牛肉、 100 g水,煮熟)。
?。ǘ┯闷? 顯微鏡、放大鏡、電爐、恒溫培養(yǎng)箱、載玻片、蓋玻片、滴管、微吸管、解剖針、燒杯、培養(yǎng)皿、凹玻璃片、紗布、吸水紙、大頭針、瓊膠、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%的甲基纖維素溶液、碘液、葡萄糖、氯化鈉、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的洋紅溶液、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的中性紅溶液。
(三)采集和培養(yǎng) 1.采集 選取多處進(jìn)行采集。
凡是有機(jī)物含量豐富的污水,均可采250~500 mL水樣,當(dāng)場(chǎng)用放大鏡檢查。
水樣鏡檢,凡呈乳白色,個(gè)體較大,圓柱狀,一端稍圓一端稍尖的動(dòng)物,就是草履蟲。
如果多次檢查均未發(fā)現(xiàn)草履蟲,水樣可棄之,另選別處采集。
水樣取回,經(jīng)顯微鏡檢查,凡含有草履蟲的水樣,要在離水樣瓶10~20cm處,放置一盞燈,經(jīng)以24 h照明,使草履蟲向水的上層聚集。
2.培養(yǎng)液制備 制備方法較多,可根據(jù)教學(xué)實(shí)際進(jìn)行選用。
?。?)稻草培養(yǎng)液 干稻草10g,剪成3Cm長(zhǎng),放人燒杯,加水1000 m1,煮沸10~15 min,放涼,補(bǔ)足失去水分。
在1000 mL水面處劃一刻度線,便于日后失水再補(bǔ)。
?。?)玉米雄花穗培養(yǎng)液 干玉米雄花穗15 g,剪成3Cm長(zhǎng),加水1000 m1,煮沸10~15 min。
?。?)荷葉培養(yǎng)液 干荷葉50 g,適當(dāng)撕碎,加水1000 mL,煮沸15~20 min。
?。?)麥粒培養(yǎng)液 小麥粒100顆,加水1000 mL,煮沸10~15 min。
?。?)離芭、稻草混合培養(yǎng)液 離芭葉25 g,加水500 m1,煮沸5 min,補(bǔ)足失去的水分后,再加稻草培養(yǎng)液500 m1。
?。?)干酵母培養(yǎng)液 市售干酵母0.59,加水1000 mL,搖蕩均勻后備用。
?。?)臟器培養(yǎng)液 動(dòng)物內(nèi)臟5g,剪碎,加水1000 m1,浸泡1 d,濾去內(nèi)臟與殘?jiān)?,留下純凈培養(yǎng)液。
?。?)蛋黃培養(yǎng)液 煮熟雞蛋黃2g,加水1000 m1,攪拌均勻。
?。?)稻草墊培養(yǎng)液 舊稻草墊,取其10 g,剪成3cm長(zhǎng),加水1000 mL,再加50g葡萄糖。
以上方法中,第1~8種,無論培養(yǎng)液煮沸與否均要放進(jìn)恒溫箱,在25~300C下培養(yǎng)1~2 d,目的是促使培養(yǎng)液長(zhǎng)出細(xì)菌,以便接種草履蟲后,供草履蟲索餌。
而第9種方法,既不需煮沸培養(yǎng)液,又不需接種草履蟲,直接將培養(yǎng)液放進(jìn)恒溫箱培養(yǎng),只要稻草上附有草履蟲包囊,當(dāng)包囊處于適宜條件時(shí),草履蟲就會(huì)破囊而出,進(jìn)行旺盛的代謝活動(dòng),在5~7 d內(nèi)大量繁殖起來。
3.培養(yǎng) 下面介紹三種培養(yǎng)方法。
?。?)采集的水樣經(jīng)一晝夜照光,從水面下1Cm處,在瓶壁上已經(jīng)形成一圈“白線”的地方,用微吸管取液。
滴一滴到載片上,經(jīng)鏡檢證實(shí)水滴中只含草履蟲,無任何其他微型生物時(shí),就可用一個(gè)新的干凈滴管吸培養(yǎng)液,將載片上的草履蟲吹人培養(yǎng)瓶中,放置在25~300C環(huán)境中繼續(xù)培養(yǎng)5~7 d,草履蟲就會(huì)大量繁殖起來。
?。?)如果水樣中混有少量其他微型生物,可以在載片上先滴一滴牛肉汁,再滴一滴含有草履蟲的水樣,兩滴間距2cm左右,用解剖針從肉汁一端引一條線到含有草履蟲的水滴上。
兩滴連結(jié)后,用放大鏡仔細(xì)觀察,會(huì)發(fā)現(xiàn)草履蟲對(duì)牛肉汁敏感性很強(qiáng),草履蟲游到牛肉汁滴的速度也快。
然后迅速將載玻片放置在顯微鏡下檢查,在確認(rèn)牛肉汁滴內(nèi)尤其他微型生物時(shí),迅速用吸水紙切斷連結(jié)線,用紗布擦干另一側(cè)的水滴,用于凈滴管把含草履蟲的牛肉汁吹人培養(yǎng)瓶中。
如此重復(fù)操作幾次,然后將培養(yǎng)瓶放在25~300C溫度下繼續(xù)培養(yǎng),5~7bd后就會(huì)有大量草履蟲繁殖出來。
(3)如果水樣中混雜微型生物的種類與數(shù)量過多,不易排除,就需要采用逐步擴(kuò)大法。
一般是從水樣中取液,在凹玻片內(nèi)滴上1~2滴,放置在顯微鏡下,邊觀察邊用微吸管吸走其他微型生物。
當(dāng)凹坑水中無任何其他微型生物而只含草履蟲時(shí),往凹坑放少許培養(yǎng)液,在25~300C下培養(yǎng),每日補(bǔ)加1/3~2/3培養(yǎng)液。
如果幾天后,草履蟲數(shù)量有所增加,就將其轉(zhuǎn)入表面皿或培養(yǎng)皿,繼續(xù)擴(kuò)大培養(yǎng)。
如果再過幾天后草履蟲純化培養(yǎng)效果理想,數(shù)量又有所增加,就要再轉(zhuǎn)入大容器培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),一直到大容器培養(yǎng)液出現(xiàn)云霧狀群落,鏡檢全是草履蟲時(shí)為止。
這里特別需要指出的是,草履蟲的培養(yǎng)有可能失敗。
究其原因很多,其中有兩點(diǎn)是主要的:其一,可能是接種草履蟲的數(shù)量過少,個(gè)體質(zhì)量又較差,它們進(jìn)入新環(huán)境后,遇有不適,很快死去,未能傳宗接代;其二,可能是稻草之類的材料發(fā)霉或殘留農(nóng)藥過多,接種后的草履蟲中毒死亡,不能繁殖。
因此,一旦發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液混濁、有特異臭味,鏡檢無草履蟲,就要棄之。
為避免由于培養(yǎng)失敗貽誤教學(xué)工作,應(yīng)多做幾瓶培養(yǎng)液,多選用幾種培養(yǎng)方法。
4.保種 下面介紹三種保種方法。
?。?)培養(yǎng)和觀察草履蟲的實(shí)驗(yàn)一結(jié)束,可將培養(yǎng)液集中在一起,放置在環(huán)境適宜處,時(shí)常滴上1~2滴牛奶(或豆?jié){),再補(bǔ)足失水量。
這些水樣就是培養(yǎng)新的草履蟲的材料,使用起來十分方便。
(2)也可以將實(shí)驗(yàn)所剩培養(yǎng)液,注入幾支試管里,按1:4比例,注入新的麥粒浸出液,管口用脫脂棉封住,然后將試管捆在一起,外裹紗布,豎放在容器內(nèi),就可長(zhǎng)期保存。
(3)也可以在所剩培養(yǎng)液的容器上,加蓋一張較厚的潔凈的紙,天長(zhǎng)日久,培養(yǎng)液會(huì)逐漸干涸,只剩干稻草。
實(shí)驗(yàn)前,只要向容器里加注涼開水,攪拌一下,浸漬ld。
用這種浸漬液作接種材料,放人預(yù)制的新培養(yǎng)液里,在25~300C的環(huán)境中培養(yǎng),3~5 d后就會(huì)有新的草履蟲出現(xiàn)。
二、觀察草履蟲的方法步驟 ?。ㄒ唬┎萋南x對(duì)刺激的反應(yīng) 取一滴清水,滴到干凈載片上。
在清水滴旁邊滴一滴含草履蟲的培養(yǎng)液,在培養(yǎng)液遠(yuǎn)離清水滴的邊緣放一小條棉纖維,再在棉纖維未端放一點(diǎn)食鹽,然后用解剖針迅速從清水滴一側(cè)向培養(yǎng)液水滴劃去,將兩者連通起來。
這時(shí)逐步溶解的氯化鈉沿著棉纖維橋梁緩緩進(jìn)入培養(yǎng)液滴中,草履蟲由于受到氯化鈉的刺激,立即產(chǎn)生強(qiáng)烈的回避反應(yīng),一個(gè)個(gè)向清水滴游去。
(二)草履蟲的運(yùn)動(dòng)、消化、排泄細(xì)胞器的觀察 1.第一種方法 在載玻片上,滴一滴草履蟲培養(yǎng)液,再加一滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%的甲基纖維素液,用大頭針輕輕混勻,蓋好蓋片,蟲體由于在較軸稠環(huán)境中,運(yùn)動(dòng)受到極大限制,速度明顯減慢,在低倍鏡下很容易找出運(yùn)動(dòng)最慢者,將它移至視野中央,轉(zhuǎn)換高倍鏡進(jìn)行觀察,會(huì)見到蟲體呈倒草鞋形,口溝明顯,周身纖毛緩緩擺動(dòng),胞咽內(nèi)波動(dòng)膜急速地運(yùn)動(dòng),體內(nèi)有大量的食物泡隨著細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)而流動(dòng)。
如果我們緊盯著蟲體一端觀察,就會(huì)見到放射狀的收集管與位于其中間的伸縮泡交替擴(kuò)張與收縮。
用這種方法進(jìn)行觀察,最好在20 min之內(nèi)完成,否則蟲體會(huì)發(fā)生變形崩解,如未觀察完,需重新制片。
在制片時(shí),為了能顯示出食物泡,可以在滴好的培養(yǎng)液中,用玻璃棒蘸少量質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的洋紅溶液與質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的中性紅溶液與之相混,靜置3~5min,再加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%的甲基纖維素液,這樣制片后鏡檢就能見到大小不一呈紅色的食物泡,在草履蟲體內(nèi)隨細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)而流動(dòng)。
2.第二種方法 在載片上,先將滴加的培養(yǎng)液與染液相混,將一根略長(zhǎng)于載片寬度的頭發(fā),放在液滴右側(cè),垂直于載片長(zhǎng)邊方向放好,然后蓋上蓋玻片,使頭發(fā)上下兩端正好露在載片之外。
取一小塊吸水紙,沿著蓋片有頭發(fā)一側(cè)的邊緣吸水,吸到蓋片下的水分大多被吸走而又沒有出現(xiàn)失水空缺的現(xiàn)象為止。
這時(shí),用左手輕按著蓋片,右手將頭發(fā)輕輕拉出,這樣載片與蓋片通過剩余的極少量水而緊緊地貼在一起。
在低倍鏡下觀察,就會(huì)看到放置頭發(fā)的位置,有不少草履蟲被阻遏在那里,并被蓋片壓成扁平狀,找出其中運(yùn)動(dòng)最緩慢者,轉(zhuǎn)換高倍鏡繼續(xù)觀察。
?。ㄈ┐蠛说挠^察 滴一滴培養(yǎng)液于載片上,加少許碘液與之相混,蓋好蓋片。
在低倍鏡下觀察,就會(huì)發(fā)現(xiàn)被殺死的草履蟲的身體中央,有一個(gè)大的腎形結(jié)構(gòu)被染成深褐色,這就是草履蟲的大核。
(四)草履蟲接合生殖現(xiàn)象的觀察 經(jīng)研究,每一種草履蟲內(nèi)存在著不同的繁殖群,每一個(gè)繁殖群內(nèi)又存在不同的接合型,只有同一個(gè)繁殖群內(nèi)不同的接合型之間才能發(fā)生接合,進(jìn)行接合生殖。
過去那種將含有生長(zhǎng)旺盛的草履蟲的培養(yǎng)液,經(jīng)離心去掉培養(yǎng)液,加自來水稀釋,間隔一段時(shí)間觀察接合生殖現(xiàn)象的方法,之所以有時(shí)觀察到的接合生殖率過低,其主要原因在于它們大多數(shù)屬于不同的繁殖群,不會(huì)發(fā)生接合,只有少數(shù)草履蟲屬于同一個(gè)繁殖群內(nèi)的不同接合型,所以觀察到的接合生殖現(xiàn)象甚少。
為了避免上述接合生殖率過低的現(xiàn)象發(fā)生,就要把多處采來的草履蟲,單獨(dú)進(jìn)行純化培養(yǎng),并編號(hào),勿混。
當(dāng)草履蟲旺盛的生長(zhǎng)勢(shì)頭達(dá)到頂點(diǎn),培養(yǎng)液開始出現(xiàn)變清透明的時(shí)候,表明蟲體已飽食即要轉(zhuǎn)入饑餓,這時(shí)可將各個(gè)培養(yǎng)液一一進(jìn)行離心,然后將濃集的草履蟲按照序號(hào)兩兩之間進(jìn)行混合,放在20~250C環(huán)境下,每隔1h觀察一次,如果發(fā)現(xiàn)某組蟲體間發(fā)生接合,成對(duì)現(xiàn)象較多,就表明它們是屬于同一繁殖群內(nèi)的兩個(gè)相對(duì)接合型。
以后只要將這兩個(gè)相對(duì)接合型蟲體各自分開培養(yǎng),不斷提供充足餌料,并讓它們保持旺盛生長(zhǎng),就可以隨時(shí)取樣相混合,草履蟲會(huì)立即或在數(shù)小時(shí)之內(nèi)發(fā)生接合生殖。
培養(yǎng)草履蟲的方法
我是學(xué)生物的,原來養(yǎng)小型魚繁殖時(shí)都是自己培養(yǎng)草履蟲作為開口糧,剛看到魚友講述培養(yǎng)經(jīng)歷感覺不夠完整,回想一下把自己所學(xué)與大家分享1、培養(yǎng)液取2個(gè)大號(hào)可樂瓶剪去上部做成30cm高的敞口瓶,找些稻草(菜市場(chǎng)捆菜的就行)剪成20CM長(zhǎng)40根,稻草洗凈放鍋里煮開晾涼,每瓶放20根稻草加入稻草湯將將沫過稻草,再加5CM的自來水OK2、自然培養(yǎng)保持水溫20-25度10天左右自然繁殖出草履蟲,13天的時(shí)候達(dá)到繁殖高峰水面出現(xiàn)一層白膜,分一些到新的培養(yǎng)液里繼續(xù)培養(yǎng)可以保持供給3、取種培養(yǎng)(原種)自然水域或小河溝里找些水面漂游白膜的(10度以下無法取種)用小瓶取一些帶點(diǎn)水做種液(分離)牛肉擠些汁滴在玻璃板上一大滴,旁邊滴一大滴種液,用針將兩滴液體連出一條線,草履蟲會(huì)跑到牛肉汁那邊(取種)將兩滴間的連線用紙巾截?cái)?,用吸管吸取牛肉汁就可以?dāng)種放入培養(yǎng)液了4、提純?nèi)》N培養(yǎng)會(huì)帶入很多其他種類的原生物、單細(xì)胞生物和變形蟲等,所以需要提純,培養(yǎng)5天后取水面靠近瓶壁的液體放入新的培養(yǎng)液,5天后再重復(fù)操作一次就能得到大量純凈的草履蟲了5、喂養(yǎng)每天用紗布包一小塊熟雞蛋黃在培養(yǎng)液里涮涮或每瓶每天加兩滴牛奶即可讓草履蟲吃飽6、開口糧小魚出生至卵黃縮小后就可以喂了,喂食5天后草履蟲的營養(yǎng)就不足以滿足小魚了所以最好改用其他飼料畢業(yè)十幾年了,就記得這些了,希望對(duì)大家有用
河里有哪些動(dòng)物
魚類、甲殼類(蝦、螃蟹等)、軟體類(河蚌等)、兩棲類(青蛙、蟾蜍等)、爬行類(水蛇、龜?shù)龋⒏∮紊镱悾ú萋南x等等)
蟬能聽見聲音嗎
草履蟲的伸縮泡能排除體內(nèi)的廢物,這怎么可能大核:營養(yǎng)代謝 小核:內(nèi)含遺傳物質(zhì),生殖作用伸縮炮數(shù)目不固定,草履蟲體內(nèi)多余的水分和廢物會(huì)被收集管和伸縮泡收集起來,排到體外.人體的腎臟的主要功能是形成尿液,排出體外。
雙小核草履蟲(長(zhǎng)80~170微米,伸縮泡2個(gè),有兩個(gè)小核,很小)、多小核草履蟲(長(zhǎng)180~310微米,有時(shí)有3個(gè)伸縮泡,小核泡型,有3~12個(gè))、綠草履蟲(體長(zhǎng)80~150微米,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有綠藻共生,在見光處培養(yǎng)后通體呈綠色,小核1個(gè),致密型)