摘 要：本文以梔子為材料，OD比值為指標(biāo)，研究乙醇濃度、溫度和時(shí)間對(duì)梔子黃色素提取效果影響，優(yōu)化梔子黃色素提取工藝。以藏花素為對(duì)照品，用分光光度法測(cè)不同產(chǎn)地梔子中梔子黃色素含量和色價(jià)，評(píng)價(jià)不同產(chǎn)地梔子的品質(zhì)。用大孔樹(shù)脂AB-8純化色素，研究高色價(jià)梔子黃色素的制備。得到結(jié)果：梔子黃色素最佳提取條件為60%乙醇，于40℃靜置浸提60 min;山梔子中梔子黃色素含量(13.07%)低于水梔子(平均為19.37%)，梔子黃色素含量存在品種差異;經(jīng)純化，梔子黃色素色價(jià)平均提高了3倍左右，通過(guò)純化可獲得高品質(zhì)梔子黃色素。

關(guān)鍵詞：梔子黃色素;提取工藝;含量;色價(jià)

梔子是茜草科植物梔子的成熟果實(shí)，具有護(hù)肝、利膽、降壓等多種藥理作用，是我國(guó)傳統(tǒng)中藥，在國(guó)內(nèi)分布廣泛[1]。梔子黃色素是從梔子中提取的一種優(yōu)良水溶性天然色素，屬類胡蘿卜素，主要成分是藏花素[3]，因其著色自然、性質(zhì)穩(wěn)定且具有一定的醫(yī)療保健作用而廣泛應(yīng)用于食品行業(yè)。工藝流程為果實(shí)粉碎、浸提、濃縮和純化[5]，優(yōu)良的提取工藝結(jié)合后續(xù)高效的純化加工過(guò)程才能實(shí)現(xiàn)梔子黃色素的高效優(yōu)質(zhì)生產(chǎn)。因此，優(yōu)化梔子黃色素提取工藝，提高色素提取效率和純度，具有重要實(shí)踐意義。

1 梔子黃色素提取的材料與方法

1.1 材料

梔子采自湖北省孝感市和長(zhǎng)陽(yáng)縣梔子種植基地，經(jīng)華中農(nóng)業(yè)大學(xué)藥用植物研究所王沫教授鑒定，分別為山梔子和水梔子的干燥果實(shí)。

藏紅素標(biāo)品(東京化成工業(yè)株式會(huì)社)、大孔樹(shù)脂AB-8(天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所)、梅特勒萬(wàn)分之一天枰、N-1100旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、PK-BD恒溫水浴鍋、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)、80-2臺(tái)式離心機(jī)。

1.2 方法

1.2.1 提取前處理?xiàng)d子經(jīng)剔除雜物、次果，于45℃烘干至恒重，粉碎，過(guò)40目篩，密封避光保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 提取工藝優(yōu)化準(zhǔn)確稱取0.5 g梔子粉末于具塞三角瓶中，料液比1:10加入乙醇溶液，采用一次浸提方式，提取30 min，離心，取上清液并稀釋到適當(dāng)濃度后，分光光度計(jì)測(cè)其在238 nm和440 nm處吸光值并計(jì)算OD比值，每處理3次重復(fù)，選取最佳乙醇提取濃度。同樣的.方法考察浸提方式、時(shí)間和溫度對(duì)梔子黃色素提取效果的影響。

1.2.3 方差分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS19.0軟件，用ANOVA(analysis of variance，LSD檢驗(yàn)法)進(jìn)行方差分析。

1.2.4 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線精密稱取藏花素對(duì)照品，用60%乙醇溶解并配置成濃度分別為0、0.0224、0.0448、0.0672、0.0896、0.112mgmL-1的藏花素對(duì)照溶液，以溶劑為空白對(duì)照，測(cè)其在440 nm的吸光值，以濃度為橫坐標(biāo)，吸光值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并給出回歸方程。

2 梔子黃色素提取的結(jié)果與分析

2.1 乙醇濃度與梔子黃色素提取效應(yīng)

乙醇濃度對(duì)梔子黃色素提取有顯著影響(p﹤0.05)，濃度高于25%時(shí)，隨著醇濃度增大，所得梔子黃色素的A238nm值和A440nm值增大，但同時(shí)OD比值也明顯增大(見(jiàn)表1)。以O(shè)D比值相對(duì)較小，同時(shí)A440值相對(duì)較大綜合考慮，60%乙醇為梔子黃色素最佳提取溶劑條件。

表1 乙醇濃度對(duì)梔子黃色素提取的影響

乙醇濃度(%)A238nmA440nmOD比值

250.53±0.003c

0.36±0.058d0.19±0.0088d

0.27±0.0067b2.789±0.1436ad

1.333±0.0175c

600.55±0.093c0.36±0.0116a1.528±0.0268bc

750.69±0.033b0.38±0.0067a1.816±0.0802b

950.80±0.040a0.27±0.0195bc2.963±0.1903a

2.2 浸提方式和時(shí)間與梔子黃色素提取效應(yīng)

以60%乙醇為溶劑，室溫條件下，靜置和震蕩(140r·min-1)兩種浸提方式所得梔子黃色素在440 nm處吸光值及OD比值沒(méi)有顯著差異(p﹤0.05)，且在150 min內(nèi)，靜置或震蕩時(shí)間的延長(zhǎng)不影響梔子黃色素提取效應(yīng)(見(jiàn)表2)。

表2 浸提方式和時(shí)間對(duì)梔子黃色素提取的影響

提取時(shí)間A238nmA440nmOD比值

震蕩?kù)o置震蕩?kù)o置震蕩?kù)o置

30min0.76±0.00860.68±0.010.44±0.00710.39±0.00821.74±0.0551.73±0.053

60min0.74±0.0280.74±0.00840.42±0.0150.42±0.00441.77±0.00481.75±0.005

90min0.76±0.0120.79±0.00280.43±0.00230.45±0.0051.74±0.0181.77±0.014

120min0.78±0.0120.73±0.00870.45±0.0110.42±0.00611.74±0.0381.73±0.0069

150min0.78±0.00530.74±0.010.44±0.00680.42±0.00561.76±0.0171.75±0.0025

3 結(jié)論與討論

乙醇濃度對(duì)梔子黃色素提取效應(yīng)有顯著影響，浸提方式和時(shí)間對(duì)梔子黃色素提取效果無(wú)顯著影響，梔子黃色素表現(xiàn)出良好